博迅振蕩培養(yǎng)箱對(duì)煙草赤星病菌的拮抗研究應(yīng)用

    烤煙一旦患上赤星病，葉片上就會(huì)出現(xiàn) 很多病斑，影響烤煙進(jìn)行正常的光合作用，阻礙烤煙的健康 生長。隨著化學(xué)農(nóng)藥殘留和環(huán)境污染問題的日趨嚴(yán)重，在 煙草病害防治過程中應(yīng)減少化學(xué)農(nóng)藥的使用。芽孢桿菌是 一類產(chǎn)芽孢、革蘭氏染色呈陽性的細(xì)菌類群，具有較好的生 物防治煙草病害的潛力，已成為研發(fā)生物防治菌劑的理想對(duì) 象。儀器: 立式壓力蒸汽滅菌鍋 LDZX－50KBS，上海申安醫(yī)療器械廠; 單人垂直送風(fēng)超凈工作 臺(tái)，蘇凈集團(tuán)安泰公司; 振蕩培養(yǎng)箱 BSD-250型，上海博 迅實(shí)業(yè)有限公司醫(yī)療設(shè)備廠; 小寶多功能粉碎機(jī) XY－600B， 永康市小寶電器有限公司; 101 型電熱鼓風(fēng)干燥箱，北京科偉 永興儀器有限公司; 調(diào)速多用振蕩器 HY－4，國華電器有限公 司; OLYMPUS CX31 光學(xué)顯微鏡等。 工具: 玻璃錐形瓶、培養(yǎng)皿、涂布棒、小量筒、試管、打孔 器、接種環(huán)、離心管、移液槍等。 LB 固體培養(yǎng)基: 酵母 5 g、蛋白胨 10 g、NaCl 10 g、瓊脂 15～20 g、無菌水 1 000 mL。PDA 固體培養(yǎng)基: 馬鈴薯 200 g、 葡萄糖 20 g、瓊脂 15～20 g、無菌水 1 000 mL。

    平板對(duì)峙試驗(yàn)的初始 菌物數(shù)量條件，以完全長滿 PDA 培養(yǎng)皿的煙草赤星病菌為 原始病菌條件，以一打孔器口徑( 直徑 6 mm) 為平板對(duì)峙試 驗(yàn)中煙草赤星病菌的接入量。操作流程: 用接種環(huán)從 JW－5－ AN 菌株試管中挑取芽孢桿菌，以肉眼可見接種環(huán)上載有芽 孢桿菌為第一節(jié)點(diǎn); 將載有芽孢桿菌的接種環(huán)置于盛有 100 μL 無菌水的離心管中攪拌，以肉眼可見接種環(huán)上的芽 孢桿菌全部進(jìn)入離心管內(nèi) 100 μL 無菌水為第二節(jié)點(diǎn); 搖勻 離心管，制成 JW－5－AN 芽孢桿菌菌懸液; 再用移液槍吸取 2 μL 菌懸液作為平板對(duì)峙試驗(yàn)菌株 JW－5－AN 的接入量。經(jīng)過觀察及測(cè)量，貝萊斯 芽孢桿菌 JW－5－AN 與煙草赤星病菌的平板對(duì)峙 5 d 樣本數(shù) 據(jù): 煙草赤星病菌 5 d 最大長度 56．9 mm，煙草赤星病菌 5 d 最小寬度 29．1 mm，貝萊斯芽孢桿菌 JW－5－AN 對(duì)煙草赤星 病菌的 5 d 抑制直徑為煙草赤星病菌 5 d 最大長度減去煙草 赤星病菌 5 d 最小寬度，為 27．8 mm。