潔凈工作臺(tái)無菌環(huán)境維持時(shí)間的確定

潔凈工作臺(tái)操作空間經(jīng)乙醇輔助紫外殺菌后仍然可以維持無菌一段時(shí)間.本文采用的培養(yǎng)基置于無菌潔凈工作臺(tái)中 48 h，結(jié)果如圖 2 所示，經(jīng)殺菌后的潔凈工作臺(tái)無菌空間環(huán)境可保持 12 h，之后培養(yǎng)基表面開始有細(xì)菌生長(zhǎng)，36 h 后細(xì)菌總數(shù)的增加速度顯著加快.

本文以含菌培養(yǎng)基作為試驗(yàn)材料，通過對(duì)潔凈工作臺(tái)紫外殺菌效果的研究，發(fā)現(xiàn)殺菌時(shí)間越長(zhǎng)，殺菌效果越明顯，當(dāng)殺菌時(shí)間達(dá)到 30 min 后可保證細(xì)菌分布密度為 4.08×102 CFU·cm-2 的細(xì)菌全部殺滅.進(jìn)一步表明紫外殺菌是用于潔凈工作臺(tái)空間殺菌最有效的方式.研究表明，乙醇輔助紫外殺菌比單純紫外殺菌的效果更加顯著，這與以往復(fù)合殺菌的研究結(jié)果一致.

本文采用的 75%乙醇可除去細(xì)胞膜中的脂質(zhì)并滲透到細(xì)菌體內(nèi)，使蛋白質(zhì)變性.另外，乙醇也會(huì)破壞微生物體內(nèi)的多種酶，阻礙細(xì)菌代謝和抑制生長(zhǎng)繁殖.此外再經(jīng)紫外線照射，空氣中的氧氣電離產(chǎn)生臭氧，增強(qiáng)了殺菌效果.經(jīng)殺菌后的潔凈工作臺(tái)空間可維持無菌環(huán)境 12 h，之后又生長(zhǎng)出來的菌落可能是培養(yǎng)基上的個(gè)別菌株并未完全被紫外線殺死，而是僅抑制了其生長(zhǎng)或使菌體產(chǎn)生了保護(hù)膜，待到時(shí)機(jī)成熟時(shí)細(xì)胞將保護(hù)膜沖破而菌體復(fù)活，因此隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，培養(yǎng)基上再生的菌落數(shù)越多.另外，還有細(xì)菌受到紫外照射后具有光復(fù)活現(xiàn)象導(dǎo)致菌落數(shù)增加.

鑒于此，本文建議研究者們可采用 75%乙醇輔助紫外來縮短潔凈工作臺(tái)殺菌時(shí)間，殺菌后的操作空間可在 12 h 內(nèi)保證無菌，有效地延長(zhǎng)了潔凈工作臺(tái)紫外燈的使用壽命.